در اینجا، sCRAM (موتیف مجاور پروتوسپیسر نابهینه (PAM)-واسطه شده CRISPR RNA و نوکلئاز Cas12a همراه با تقویت سریع همدما چند آنزیمی)، یک پلت فرم تشخیصی سریع و رایگان-که ASFV 20 دقیقه را تشخیص می دهد، ایجاد کنید. sCRAM یک مرحله آزادسازی اسید نوکلئیک سریع (40 درجه، 5 دقیقه) را با یک واکنش یک لوله‌ای ترکیب می‌کند که تقویت همدما چند آنزیمی (MIRA) و یک PAM{8}} با واسطه CRISPR/ را با هم ترکیب می‌کند.
سیستم Cas12a (37 درجه، 15 دقیقه)، ابزار را قادر می‌سازد-خواندن بصری رایگان از طریق نور UV یا نوارهای جریان جانبی (LFS) را انجام دهد. ارزیابی 111 نمونه شبیه سازی شده و بالینی (شامل خون، پلاسما و سواب) 100% مطابقت با qPCR برای بازخوانی UV و 98.20% برای LFS نشان داد.
بازخوانی، با هر دو روش 100٪ ویژگی. سادگی، سرعت و قابلیت انطباق میدانی sCRAM بر پتانسیل آن برای نظارت غیرمتمرکز ASFV در تنظیمات محدود{2}}منابع تأکید می‌کند و ابزاری قدرتمند برای مهار شیوع بیماری ارائه می‌دهد.
در این مطالعه، ما sCRAM، یک پلت فرم تشخیص ASFV سریع و میدانی را توسعه دادیم که PAM کمتر از حد بهینه را ادغام می‌کند{1}}با CRISPR/Cas12a با تقویت همدما چند آنزیمی. این سنجش در عرض 20 دقیقه به حساسیت تک کپی 1 کپی/uL می رسد و هیچ واکنش متقابل-با پاتوژن های اصلی خوکی نشان نمی دهد. اعتبار سنجی بالینی در نمونه های خون، پلاسما و سواب مطابقت کامل با qPCR را با استفاده از بازخوانی نور UV و دقت 98.20 درصد از طریق نوارهای جریان جانبی نشان داد. با عملکرد ساده، حساسیت و ویژگی بالا، و تفسیر نتایج بصری، sCRAM پتانسیل قوی برای{11}}نظارت ASFV سایت و نقطه گسترده‌تر{12}}کاربردهای تشخیصی مراقبت ارائه می‌کند.
