سیستم RPA-CRISPR/Cas12a در این مطالعه با هدف قرار دادن ژن-بیان شده UL123 زودهنگام، به تشخیص سریع (30-40 دقیقه)، فوق العاده حساس (1 کپی/μL) HCMV دست می‌یابد، که از روش‌های مرسوم در آزمایش‌های نمونه بالینی عملکرد بهتری دارد. عفونت‌ها، به‌ویژه در بیماران دچار نقص ایمنی، و بر امکان‌سنجی تشخیص‌های مبتنی بر CRISPR برای بهبود مدیریت بیماری‌های مرتبط با HCMV{11}} تاکید می‌کند. سادگی و کارایی سنجش پتانسیل آن را به عنوان یک ابزار مراقبتی{14}برای تنظیمات محدود{16}}منابع نشان می‌دهد.
الگوهای سایت های تقویت RPA و انتخاب کیت.
(الف) طراحی پرایمر RPA با توجه به محل قطعات تقویت. فلش ها موقعیت های پایه را از ابتدا تا انتهای قطعه تقویت شده با پرایمرهای P1-P6 نشان می دهد.
(ب) تصویر الکتروفورز ژل آگارز از محصول RPA تقویت شده با 6 مجموعه پرایمر HCMV.
(ج) غربالگری راندمان تقویت کیت های RPA از شرکت های مختلف. P: پرایمر، NC: کنترل منفی.
نتایج نشان داد که کیت AmpFuture بالاترین راندمان تقویت را نشان داد.
مقایسه میزان مثبت MIRA-CRISPR/Cas12a، PCR - روش پروب فلورسنت و qPCR در نمونه‌های بالینی.
ما از 48 بیمار بالینی نمونه خون و ادرار جمع آوری کردیم. DNA ژنومی از این نمونه ها با استفاده از کیت TIANamp Genomic DNA استخراج شد و نتایج تشخیص UL122 با روش PCR{3}}پروب فلورسنت آنالیز شد. با مقایسه نتایج ما با تشخیص‌های بالینی، روش‌های ما 6 نمونه مثبت را شناسایی کردند که در آزمایش‌های بالینی منفی بودند.
